根據(jù)輝駿生物10多年對 ChIP 實驗的研究,以下原因可能會導致 ChIP-seq 的假陽性率高:
DNA 片段化方法、染色質開放性的異質性、PCR 擴增偏差、基因組重復以及測序和序列比對中的錯誤會導致假陽性,測序后,將序列與已知基因組進行比較并確定真正的結合位點(峰)。對于轉錄因子,尋找對應“峰”的下游調控基因(靶基因)或構建轉錄因子結合位點的保守結合序列。 如果轉錄因子的基序已知,計算基序序列在“峰”序列中的百分比,即可估計實驗結果的可靠性。
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